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非整倍体细胞系通过更好的基因敲除方法得到改善

导读 CRISPR / Cas9技术基于编辑的单细胞克隆的分离和扩增,在二倍体细胞系中实现方便有效的基因组编辑。然而,这种方法对于非整倍体细胞系是...

CRISPR / Cas9技术基于编辑的单细胞克隆的分离和扩增,在二倍体细胞系中实现方便有效的基因组编辑。然而,这种方法对于非整倍体细胞系是无效的,并且一组现在已经报道了基于多轮修饰的基因组编辑的改进方法。该文章发表在Tissue Engineering上。

Maxim N. Karagyaur,医学博士,俄罗斯莫斯科国立大学罗蒙诺索夫博士和一组同事在题为“优化CRISPR / Cas9技术以敲除非整倍体细胞系感兴趣基因”的文章中介绍了他们的研究。 “作者在合并的群体中处理了四种不同的人和小鼠非整倍体细胞系,并敲除了六种不同的基因。他们新开发的方案包括重复的基因组编辑和GFP阳性细胞分选。通过对预测的位点进行测序来评估靶向和脱靶编辑,并且结果显示尽管增强了基因敲除功效,但额外的回合没有增加脱靶切割的速率。

“来自俄罗斯的Karagyaur博士及其同事描述了CRISPR / Cas9技术在非整倍体细胞培养中创建功能性细胞模型的重要发展,”组织工程联合主编约翰·P·费希尔博士表示,Fischell家族杰出马里兰大学教授兼系主任,NIH工程复合组织中心主任。“利用CRISPR- / Cas9重复循环的创新方法,该研究小组表明靶蛋白的表达可以被抑制,从而绕过克隆效应,这些效应常常在这些复杂系统中观察到。”

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