介绍T细胞功能检测原理是什么
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(一)T细胞增殖试验
1.原理:T细胞在体外受到有丝分裂原或抗原的刺激后,细胞增殖,并转化为淋巴母细胞。因此,淋巴细胞增殖反应又称淋巴母细胞转化。
2.刺激物:植物血凝素(PHA)、刀豆素A(ConA)和美洲商陆(PWM)、白喉类毒素、破伤风类毒素、纯化蛋白衍生物(PPD)和白色念珠菌等。
3.方法学:检测T细胞增殖反应的方法有:
(1)形态学检查法:运用普通光学显微镜,简便易行。缺点是依靠肉眼观察形态学变化,判断结果易受主观因素影响,重复性和准确性较差。
(2)3H-TdR掺入法:敏感性高,客观性强,重复性好,但需一定设备条件,及存在放射性核素污染问题。
(3)MTT比色法:本方法的敏感性虽不及3H-TdR掺入法,但操作简便,无放射性污染。较常采用。
(二)T细胞分泌功能测定
通过对于T细胞分泌细胞因子的含量、生物学活性和基因表达水平,以反映T细胞功能。
(三)T细胞介导的细胞毒试验
常选用可传代的已建株的人肿瘤细胞,与待检淋巴细胞混合,观察肿瘤细胞杀伤的情况。是评价机体细胞免疫水平的常用指标,特别是测定肿瘤患者CTL杀伤肿瘤细胞的能力,常作为判断预后和观察疗效的指标之一。
(四)体内实验
1.特异性抗原皮肤试验:常用结核菌素皮肤试验。其他皮试抗原还有白色念珠菌素、皮肤毛癣菌素、腮腺炎病毒等。若受试者从未接触过该抗原,则不会出现阳性反应,因此阴性者也不一定表明细胞免疫功能低下。往往需用两种以上抗原进行皮试。
2.PHA皮肤试验:将定量PHA注射到受试者前臂皮内,可非特异性刺激T细胞发生母细胞转化,呈现以单个核细胞浸润为主的炎性反应。PHA皮肤试验敏感性高,比较安全可靠,临床常用于检测机体的细胞免疫水平。
延伸阅读:
T淋巴细胞
T淋巴细胞来源于骨髓的多能干细胞(胚胎期则来源于卵黄囊和肝)。在人体胚胎期和初生期,骨髓中的一部分多能干细胞或前T细胞迁移到胸腺内,在胸腺激素的诱导下分化成熟,成为具有免疫活性的T细胞。
成熟的T细胞经血流分布至外周免疫器官的胸腺依赖区定居,并可经淋巴管、外周血和组织液等进行再循环,发挥细胞免疫及免疫调节等功能。T细胞的再循环有利于广泛接触进入体内的抗原物质,加强免疫应答,较长期保持免疫记忆。T细胞的细胞膜上有许多不同的标志,主要是表面抗原和表面受体。这些表面标志都是结合在细胞膜上的巨蛋白分子。