科普免疫荧光组织化学技术的组织处理如何进行
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(一)标本的类型:
1.涂片和印片:血液、细菌培养物、脑脊液、体腔渗出液和细胞悬液等均可简单地涂抹在玻片上,干燥固定后就可用于荧光抗体染色。脑脊液、脏器(肝、脾、淋巴结等)、细菌菌落或尸体病变组织可把新鲜切面压印于玻片上做成印片,经固定后再染色。
2.组织切片:最常用。包括:
①冷冻切片:首选的制片方法。优点:操作简单,组织的抗原性保存好,自发荧光较少,特异荧光强,同时适用于不稳定的抗原;缺点:组织结构欠清晰;
②石蜡切片:研究形态学的主要制片方法,它不但是观察组织结构的理想方法,而且可进行回顾性研究。其优点是组织细胞的精细结构显现清楚,但对抗原的保存量不如冷冻切片,并有组织自发荧光和非特异性荧光,需加酶消化处理。
3.细胞培养标本:细胞在玻片上培养,形成单层,固定后用作抗核抗体等检测的抗原片。还可使细胞单层生长在玻片上,再用病毒或患者标本感染,然后固定,用荧光抗体染色法检测病毒。
4.活细胞染色:检查淋巴细胞表面抗原以及免疫球蛋白受体、癌细胞表面抗原、血清中抗癌细胞抗体等,均可用活细胞荧光抗体染色法。当同时观察细胞表面两种抗原的分布和相互关系时,可用双标记法进行染色。
(二)标本的保存
标本在固定干燥后,最好立即进行荧光抗体染色及镜检。如必须保存时,则应保持干燥,置4℃以下保存。一般细菌涂片或器官组织切片经固定后可保存1个月以上。但病毒和某些组织抗原标本抗原性丧失很快,数天后就失去其抗原性,需在-20℃以下保存。
延伸阅读:
免疫组织化学技术又称为免疫细胞化学技术,是指用标记的特异性抗原或抗体在组织细胞原位通过抗原抗体的免疫反应和组织化学的呈色反应,对相应的抗原或抗体进行定性、定位、定量测定的一项免疫学检测方法。