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总单位时间内底物减少或产物增加的量。

在t2-t1时间内吸光度的变化与所测物质浓度成正比。

实际操作中，测定两个固定时间的吸光度差值，只要此期间待测物消耗<5%，就可以采用标准浓度对照法计算样本浓度，所以动力学法有时又称为固定时间法。

与终点法相比，动态法测定中待测物无须完全转化，故工具酶的用量较少，为了保证有足够的测定线性，所用酶的Km应足够大。如所用工具酶Km太小，可在反应体系中加入竞争性抑制剂，以加大Km。

动力学法对于测定仪器的要求更严格，动态法由于测定反应动态过程中的吸光度，检测的信号小，温度对测定的影响很大，这要求仪器的电噪声小，吸光度应读准到0.0001，温度变化<0.1%。

终点法可受到乳糜、黄疸和溶血的影响，测定时需设定样品空白。