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在保证抗体过量的情况下，加入待测抗原。在反应的第一阶段，溶液中产生的散射光信号波动较大，所获取的信号计算出的结果会产生一定的误差。

1.反应阶段加入全量标本，在4分钟内测量散射光信号。

2.使所有未知抗原全部与抗体结合形成抗原-抗体复合物，故需要：抗体过量;对抗原过量进行阈值限定。