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科普免疫学检验中标本的正确收集及处理方法是什么

导读 近日有关于免疫学检验中标本的正确收集及处理方法是什么的问题受到了很多网友们的关注,大多数网友都想要知道免疫学检验中标本的正确收集及...

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用于免疫检验的临床标本最为常用的是血清(浆)。对用于激素和治疗药物测定的血清标本,要注意收集时间甚至体位对测定结果的影响。用于传染性病原体的抗原和抗体、肿瘤标志物和特种蛋白等检测的血清标本无此影响,但可能存在干扰因素。

(一)内源性干扰因素

包括类风湿因子、补体、高浓度的非特异免疫球蛋白、异嗜性抗体、某些自身抗体、因使用鼠抗体治疗或诊断诱导的抗鼠Ig抗体、交叉反应物质等。

1.类风湿因子(RF) 为避免RF的干扰,需采取:

(1)改变标记抗体。

(2)标本中RF用变性IgG预先封闭:将经热变性(63℃,10分钟)的兔、羊等的IgG加入到标本稀释液中,或是将该变性IgG连接至一颗粒固相如聚苯乙烯微球或微孔,然后加入临床血清标本,反应后,再吸出标本进行检测。此外,在测定特异IgM时,也可使用抗人IgG去除临床标本中RF和IgG。

(3)测定抗原时,可在标本中加入可使RF降解的还原剂如2-巯基乙醇。

2.补体 由补体引起的干扰可通过下述方法避免:

(1)对临床血清标本加热灭活补体。

(2)包被或标记二抗使用特异的鸡抗体。

3.异嗜性抗体 人类血清中含有抗啮齿类动物(如鼠等)的Ig的抗体,即天然异嗜性抗体。异嗜性抗体可通过交联固相和标记的单抗或多抗而出现假阳性反应。可通过下述方法避免:

(1)使用特异的兔F(ab')2片段作为固相或测定标记抗体。

(2)在标本或标本稀释液中加入过量的动物Ig,封闭可能存在的异嗜性抗体。但加入量不足或亚类不同时无效。

(3)使用靶特异的非Ig亲和蛋白替代固相或标记抗体之一。

(4)使用特异的鸡抗体作为固相和测定抗体。

4.由抗鼠抗体引起的干扰可通过下述方法避免:

(1)使用特异的抗体F(ab')2片段作为固相或测定标记抗体。

(2)在标本或标本稀释液中加入过量的鼠Ig,封闭可能存在的抗鼠抗体。

(3)使用特异的鸡抗体IgG作为固相和测定抗体。鸡抗体IgG不与人抗鼠抗体反应。因而,用其作为固相或标记抗体不会出现假阳性结果。

(二)外源性干扰因素

包括标本溶血、标本被细菌污染、标本贮存时间过长、反复冻融和标本凝固不全等。

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