nature

当前位置: Nature » 蛋白&蛋白质组学 » 正文

Scientific Reports:厦门大学肖卫华研究组用酵母“酿制”出药用价值蛇毒蛋白

摘要 : 近日,厦门大学细胞信号网络协同创新中心肖卫华教授研究组和兆科药业(合肥)有限公司合作,利用酵母表达系统成功开发了一个治疗血栓的蛇毒蛋白药物的高效重组制备方法。

 近日,厦门大学细胞信号网络协同创新中心肖卫华教授研究组和兆科药业(合肥)有限公司合作,利用酵母表达系统成功开发了一个治疗血栓的蛇毒蛋白药物的高效重组制备方法。相关研究成果发表于2015年7月6日上线的Nature集团旗下刊物《Scientific Reports》。

蛇毒抗血小板溶栓素Agkisacutacin(商品名:安菲博肽)为一种新型的GPIb靶向药物,上世纪90年代初由中国科学技术大学从皖南尖吻蝮蛇毒液中发现,具有高效抗血小板粘附、聚集的活性。兆科药业(合肥)有限公司于2014年完成了该药物临床II期研究。研究结果显示,“安菲博肽”具有显著的抗血小板粘附、聚集的效果,并具有出血倾向小、对血小板数目和功能没有影响、对凝血功能没有影响、免疫原性低等突出的特点,是目前唯一以GPIb为靶点并在临床研究中的抗血栓药物。

尽管“安菲博肽”在临床研究中表现出了良好的成药性及安全性,但因早期研究开发一直采用天然蛇毒生化提取的方法,存在着潜在安全风险及自然资源限制的问题。为此,兆科药业(合肥)有限公司与中国科学技术大学合作,开展基因重组蛇毒抗血小板溶栓素的开发研究。目前,已获得高效表达酵母菌株,建立了中试规模发酵生产工艺和质量控制标准。检定结果显示,基因重组蛇毒抗血小板溶栓素与其天然提取物有高度相似的理化特性及生物活性。基因重组蛇毒抗血小板溶栓素不仅有效的解决了自然资源限制、显著降低生产成本,更可解决生化提取方法的潜在安全问题。该项合作研究体现了产学研合作促进企业创新和产业升级的作用(图1)。

d135cc08-428a-40a4-b8d8-675f002acd29

图1. 天然提取Agkisacutacin与基因重组Agkisacutacin生产工艺对比

该研究论文的第一作者为中国科学技术大学生物技术药物安徽省工程中心的郭雨刚特任副研究员。该项研究工作得到了国家自然基金、安徽省自然基金、校青年基金以及兆科药业等项目的支持。

原文摘要:

Balancing the expression and Production of a Heterodimeric Protein: Recombinant Agkisacutacin as a Novel Antithrombotic Drug Candidate

原文摘要:

Agkisacucetin extracted from the venom of Agkistrodon acutus has been demonstrated to be a promising antithrombotic drug candidate in clinical studies due to its function as a novel platelet membrane glycoprotein (GP) Ib inhibitor. Agkisacucetin is a heterodimeric protein composed of α- and β-subunits with seven disulphide bonds. Both subunits form inactive homodimeric products, which cause difficulties for recombinant production. In this study, Agkisacucetin α- and β-subunits were inserted sequentially into the chromosome of Pichia pastoris at the mutant histidinol dehydrogenase gene and ribosomal DNA repeat sites, respectively. By optimizing the gene copies and productivity of each subunit by drug screening, we successfully obtained a recombinant strain with balanced expression of the two subunits. Using this strain, a yield greater than 100 mg/L recombinant Agkisacucetin in fed-batch fermentation was reached. The recombinant Agkisacucetin possessed extremely similar binding affinity to recombinant GPIb and human platelets in in vitroassays, and its ristocetin-induced platelet aggregation activity ex vivo was identical to that of the extracted native Agkisacucetin, demonstrating that the yeast-derived Agkisacucetin could be an effective alternative to native Agkisacucetin. Moreover, this study provides an effective strategy for balancing the expression and production of heterodimeric proteins in P. pastoris.

来源: Scientific Reports 浏览次数:0

热门文章TOP

RSS订阅 - 填写您的邮件地址,订阅我们的精彩内容: - 网站地图
网站联系电话:020-87540820 备案号:粤ICP备11050685号-8 增值电信业务经营许可证:粤B2-20120479
©2011-2015 生物帮 All rights reserved.